vivid血浆分离膜在poct行业中的应用 | 医疗科普-欧洲杯线上买球
在不使用离心机的情况下，从全血样本中分离出高质量的血浆。
血液作为的主要样本来源，血浆或血清的分离是快速检测的第一步。在不使用离心机的情况下，从全血样本中分离出高质量的血浆，是开发即时（床旁）诊断产品的前提条件之一，以满足终端用户对产品操作简便、快速和准确性的要求。
然而，全血分离的复杂性和难点在于仍然没有商业化可以分离小量体积（10-100 μl）的过滤系统。借助膜材过滤分理出高质量的血浆并非易事，因全血样本体积少，血浆回收率低，且极易溶血造成下游背景深或非特异性反应等干扰。
选择合适的血浆分离膜可有效地产生与离心法同等质量的血浆，并支持优化侧向层析和微流控等产品的诊断流程。
选择血浆分离膜时应当考虑哪些关键参数？
为满足即时检验产品灵敏度和准确率的要求，在选择时，应当考虑以下因素：
- 全血承载量
并非所有的血浆分离膜都能承载同样体积的全血，为了达到最佳的分离效果，需了解膜材单位面积的样本承载量（体积/cm²），以确保样本被完全吸收。
- 血浆回收率
血浆分离膜材应有效滤除红细胞，高效分离出所需血浆。精确控制膜材厚度，确保其持有尽量小的膜空腔体积，可使同等的全血样本可产出尽量多的血浆。
不同材质的膜材对非血浆成分如血细胞的滤除效率不同，可分离出的血浆量也会不同。较常使用的材质如不对称聚砜和玻璃纤维，聚砜的血浆回收率高可达60~80%，而玻璃纤维的仅能部分滤除血细胞，相对比较而言，其血浆回收率仅30-50% 5。若玻纤需达到同等回收率，需更大的样品体积。
- 溶血
血浆分离膜材应最大限度降低溶血，防止产生背景色、干扰下游反应。溶血会影响诊断检测的效果，导致血清或血浆中呈现明显的粉红色，增加免疫分析的背景。较多文献报道，溶血还会改变临床相关标记物。血液标本发生溶血后, 红细胞大量的破坏，存在于红细胞内的酶类释放到细胞外，进而导致ast、ck、ck-mb、ld、α-hbdh 等心肌酶显著升高，影响临床对指标判读的准确性6。
在电化学发光双抗体夹心法测定的过程中，溶血会影响ctn、mb、ck-mb等心肌类指标的检测7。
对于核酸类检测，全血样本中的血细胞及其他组分如血红蛋白和乳铁蛋白，一定程度上可抑制dna聚合酶，降低pcr效率，影响定量结果8。
因此，有必要使用高效的膜材防止溶血，同时，可滤除干扰物质以保证精准的检测结果。玻璃纤维材料常会发生溶血，干扰下游分析。此时，选择一款可最大限度降低溶血的材料，且了解检测本身可承受的最大程度溶血，这一点极为重要。
- 分离时间
如果检测有时间限制，需了解膜材的血浆分离时间。不同材质的膜材，分离时间会有所不同。
- 非特异性结合
玻璃纤维材料虽常用于血浆分离，但因其会非特异性吸附一些目标分析物，如脂类（胆固醇），而限制其某些应用。对血浆分离膜材进行非特异性吸附的评估，以确保目标分析物不被结合于膜材基质内，从而保证下游检测的准确性。聚砜材质的血浆分离膜不会非特异性吸附心肌标志物5。
颇尔vivid血浆分离膜 一步法血浆分离
具有良好的分离性能，可快速高效地从全血样本中分离出血浆。在两分钟内即产生高质量血浆，血浆回收率大于60%~80%（理论值），低溶血风险。
- 可靠的性能
vivid血浆分离膜属不对称聚砜材质，具有一定机械强度，通过不对称孔径进行尺寸排阻过滤，将全血衍生物如红细胞、白细胞、血小板截留在膜基材内（图1），快速有效地从全血中分离出高质量血浆，低溶血、低吸附（如肌钙蛋白），血浆回收率最高可达80%。
图1
- 高血浆回收率
vivid 血浆分离膜的血浆回收率高达80%（理论值）（图2），而玻璃纤维产率一般在30-50%之间5。血浆回收率并不取决于全血上样量，还与血浆分离膜单位面积的样本承载量有关。
图2
- 低溶血
vivid血浆分离膜的溶血风险明显低于玻纤介质。
- 低非特异性结合
经验证，聚砜材质的血浆分离膜对目标分析物的非特异性吸附较低。
含有等量肌钙蛋白i（1 ng / ml）的新鲜全血，经vivid 血浆分离膜（实验组）和离心法（对照组）分离血浆后，测定血浆中肌钙蛋白i的浓度。数据表明（图3），实验组中肌钙蛋白i的浓度大于等于对照组中肌钙蛋白i的浓度，表明血浆分离膜对对关键心肌标志物的非特异性吸附较低。
图3
- 低样本量
vivid血浆分离膜精确控制膜材厚度，确保其持有尽量小的膜空腔体积，可使同等的全血样本可产出尽量多的血浆。
- 兼容性
血浆分离膜材是否能兼容下游金标垫、硝酸纤维素膜也极为重要。
arman nabatiyan 等人已成功验证聚砜膜材的血浆分离效果，可成功应用于poct检测hiv12。在一款直径为15.6mm装置中，上层为vivid血浆分离膜，用于分离血浆；下层为a/d玻纤，提供毛细拉力，收集血浆；该装置可在3-5min从75μl全血中有效分离血浆，回收率超过65%；数据表明，vivid血浆分离膜分离所得血浆量与离心法所得血浆量基本一致，且可用于下游检测hiv。
vivid 血浆分离膜有3种不同全血样本承载量和血浆回收率的膜材供选择
参数规格
颇尔体外诊断
颇尔提供体外诊断微孔膜和分离材料，包括血浆分离膜，样品分析和制备膜。
参考文献
5 pall media guide, 6/08, 10k, gn07.1603, pn 33522
6 石俊平，溶血标本对心肌酶类检验结果的准确性分析，中国实用医药2015年8月第10卷第23期 china prac med, aug 2015, vol. 10, no.23
7 胡孝彬，溶血对电化学发光法检测心脏标志物的影响，实用医技杂志2015年2月第22卷第2期journal of practical medical techniques，february 2015， vol. 22， no. 2
8 al-soud, w. a.; radstrom, p. j. clin. microbiol. 2001, 39, 485−493.
12 arman nabatiyan∗, zaheer a. parpia, robert elghanian, david m. kelso，membrane-based plasma collection device for point-of-care diagnosis of hiv arman nabatiyan∗, zaheer a. parpia, robert elghanian, david m. kelso. journal of virological methods 173 (2011) 37–42